Du kan inte kopiera material från denna sida.

Kongo Röd är precis som AB-PAS en specialfärg inom histopatologin. Kongo färgar både paraffininbäddade preparat och fryssnitt. Patologen beställer en Kongofärgning om frågeställningen är amyloidos. Kongo Röd är till och med gold standard för diagnosticeringen av denna sjukdom.

Amyloidos

Amyloidos är en sjukdom vars innebörden är att ett visst äggviteprotein lagras i kroppen, eftersom det inte bryts ner i tillräckligt snabb takt. Balansen mellan syntes och nedbrytning rubbas helt enkelt. Mängden lagrat amyloid vävnad ökar med tiden. Ju mer äggviteprotein som lagrats desto sämre blir organets funktion. Det sker ofta i exempelvis lever, njurar och mjälte. Därför kan du diagnosticera amyloidos genom att ta en liten biopsi från organet, och skicka det till patologen som färgar biopsin med Kongo Röd.

Hur färgningen går till

Eftersom en färgning med Kongo Röd också kräver en rutinfärgning ska du ta två snitt av klossen. Tjockleken på snittet som ska färgas enligt bör ha tjockleken 3-4 um eftersom eosinhematoxylin (HE) fungerar som bäst då. Det andra snittet ska färgas in med Kongo Röd. Hur du tar det andra snittet skiljer sig från rutin. Nu ska du ta ett glas på vilket det sitter en positiv kontroll för amyloidos.

Positiv kontroll

Den positiva kontrollen består av vävnad med redan känd amyloidos. Kontrollen sitter högst upp på glaset. Nedanför kontrollen placerar du snittet som kommer från patientprovet du arbetar med. Både snittens tjocklek ska vara mellan 5 och 10 um. Anledningen till detta är att den amyloida vävnaden inte färgas in om snittet är alltför tunt.

Den positiva kontrollen säkerställer att metoden (färgningen) fungerar. Kontrollen måste färgas in korrekt och visa positivt för Kongo Röd om du ska kunna lita på att färgningen av patientprovet är korrekt. Om både kontrollen och patientprovet förblir ofärgade av Kongo Röd kan du inte lita på att patienten har amyloidos. Det kanske var färgningen som misslyckades.

Det räcker inte att färga snittet med den sura färgen Kongo Röd. Du ska färga in samma snitt med den positiva kontrollen med hematoxylin. Detta skapar en differentiering på snittet. Det fungerar på samma differentieringen i en AB-PAS-färgning.

Resultatet

Kongo röd kan identifiera felvikta proteiner. I ett ljusmikroskop färgar Kongo Röd amyloid vävnad, elastiska fibrer och eosinofil granula röd. Cellkärnan blir blå. Om du tittar på glaset genom polariserat ljus är färgen på den amyloida vävnaden äppelgrön. Till det behöver du naturligtvis ett mikroskop som har en tillsats som låter dig använda polariserat ljus. Det vanligaste är nog att man använder sig av ett ljusmikroskop.

Kongo
Foto: Ed Uthman, patolog i Houston, Texas, USA. Bilden är hämtad från Pinterest: https://www.pinterest.se/pin/753016000169426576/ https://creativecommons.org/licenses/by/2.0/

PH-indikator

Kongo Röd används ibland som pH-indikator. Färgen blir blålila vid pH 3 och röd vid pH 5. Förr i tiden användes färgen för att färga kläder.

Källa

American Chemical Society. Molecule of the week archive. Congo red.2014. (Hämtad 2019-09-20). https://www.acs.org/content/acs/en/molecule-of-the-week/archive/c/congo-red.html Accent 1;\https://creativecommons.org/licenses/by/2.0/

Bourne, D. Arkana Laboratories. Congo Red Stain. https://www.arkanalabs.com/congo-red-stain/. 2017. (Hämtad 2019-02-19).

Föreningen för stöd av amyloidosforskning. http://amyloidos.se/index.html. (Hämtad 2019-02-19).

Giri, D. Alkaline congo red staining technique for amyloid: principle, procedure, and interpretation. 2019. (Hämtad 2019-01-19). Laboratoryinfo.com https://laboratoryinfo.com/alkaline-congo-red-staining-technique-for-amyloid/

IHCWorld. Life Science Products & Services. Modified Highman´s Congo Red Staining Protocol for Amyloid. 2011. (Hämtad 2019-02-19).  http://www.ihcworld.com/_protocols/special_stains/congo_red_highman.htm

National Center for Biotechnology Information. PubChem Compound Database; CID=11313, https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/11313 (accessed Feb. 20, 2019).

Congo Red – Putchler´s modification – amyloid https://library.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/MANUALS/CONGORED.PDF

Kongo Röd är gold standard vid misstänkt amyloidos

Vad tycker du?

Denna webbplats använder Akismet för att minska skräppost. Lär dig hur din kommentardata bearbetas.

%d bloggare gillar detta: